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PBS緩沖液配制方法及保存方法
更新時(shí)間:2022-06-18   點(diǎn)擊次數(shù):1867次
   PBS是磷酸緩沖鹽溶液(phosphate buffer saline)的簡稱,一般作為溶劑,起溶解保護(hù)試劑的作用。它是生物化學(xué)研究中使用最為廣泛的一種緩沖液,主要成分為Na2HPO4、KH2PO4、NaCl和KCl,由于Na2HPO4和KH2PO4它們有二級(jí)解離,緩沖的pH值范圍很廣;而NaCl和KCl主要作用為增加鹽離子濃度。(注意:PBS不是磷酸緩沖液(phosphate buffer solution,PB))
  配制方法:
  稱取8.0g NaCl、0.2g KCl、1.44g Na2HPO4、0.24g KH2PO4溶于800mL蒸餾水中,用HCl調(diào)節(jié)溶液至7.4,最后加蒸餾水定容至1L即可得0.01M PBS緩沖液。
  作用:
  PBS是磷酸緩沖鹽溶液的簡稱,不僅偽狂犬病毒要用它稀釋,一般的有活性的生物制劑都要用它來稀釋。
  原因就是它具有鹽平衡、可調(diào)整的適宜pH緩沖作用,蒸餾水不具有鹽平衡作用,可以破壞生物蛋白的結(jié)構(gòu)及生物特性;生理鹽水不具有調(diào)整pH的作用,對完整的、具有活性的物質(zhì)不能保證其在最適條件下參與生物反應(yīng),所以使用PBS是選。
  PBS也不是萬能的,有的生物活性物質(zhì)需要的條件比PBS還要高,就需要在平衡緩沖液中加入更多的成分,維持最佳的條件保證生物活性物質(zhì)保持其最完整的特性。
  PBS緩沖液的保存方法:
  加去離子水約800mL充分?jǐn)嚢枞芙?,然后加入濃鹽酸調(diào)pH至7.4,最后定容到1L。高溫高壓滅菌后置于4攝氏度冰箱保存待用。
  PBS緩沖液一般作為溶劑,起溶解保護(hù)試劑的作用,具體試劑一般也有不同的比例配方,在針對性上就有了更好的效果。
  1x PBS緩沖液就是0.01M的磷酸鹽緩沖液,可直接使用。2x PBS就是2倍濃度,使用時(shí)稀釋一倍使用。0.1M的PBS一般不用來配置緩沖液,用于其它用處。
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