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抗酸染色

更新時間:2024-09-26

簡要描述:

抗酸染色法acid-fast staining method 1882年由埃利希(F.Ehrlich),并經(jīng)F.齊爾(Ziehl)改進(jìn)而創(chuàng)造出的細(xì)菌染色法。
其中代表性的為對結(jié)核菌的齊爾-尼爾森(Ziehl-Neelsen)染色法和齊爾-加貝特(Ziehl-Gabbet)染色法。用石炭酸復(fù)紅染色后,用鹽酸乙醇分色,再用美藍(lán)進(jìn)行對比染色,即不再脫色而呈現(xiàn)石炭酸復(fù)紅的紅色。

抗酸染色法acid-fast staining method 1882年由埃利希(F.Ehrlich),并經(jīng)F.齊爾(Ziehl)改進(jìn)而創(chuàng)造出的細(xì)菌染色法。

其中代表性的為對結(jié)核菌的齊爾-尼爾森(Ziehl-Neelsen)染色法和齊爾-加貝特(Ziehl-Gabbet)染色法。用石炭酸復(fù)紅染色后,用鹽酸乙醇分色,再用美藍(lán)進(jìn)行對比染色,即不再脫色而呈現(xiàn)石炭酸復(fù)紅的紅色。


抗酸染色的原理:

分枝桿菌的細(xì)胞壁內(nèi)含有大量的脂質(zhì),包圍在肽聚糖的外面,所以分枝桿菌一般不易著色,要經(jīng)過加熱和延長染色時間來促使其著色。但分枝桿菌中的分枝菌酸與染料結(jié)合后,就很難被酸性脫色劑脫色,故名抗酸染色。齊-尼氏


抗酸染色法是在加熱條件下使分枝菌酸與石炭酸復(fù)紅牢固結(jié)合成復(fù)合物,用鹽酸酒精處理也不脫色。當(dāng)再加堿性美蘭復(fù)染后,分枝桿菌仍然為紅色,而其他細(xì)菌及背景中的物質(zhì)為藍(lán)色。


抗酸染色一般步驟

1)初染

用玻片夾夾持涂片標(biāo)本,滴加石炭酸復(fù)紅2-3滴,在火焰高處徐徐加熱,切勿沸騰,出現(xiàn)蒸汽即暫時離開,若染液蒸發(fā)減少,應(yīng)再加染液,以免干涸,加熱3-5分鐘,待標(biāo)本冷卻后用水沖洗。


2)脫色

3%鹽酸酒精脫色30秒~1分鐘;用水沖洗。


3)復(fù)染

用堿性美蘭溶液復(fù)染1分鐘,水洗,用吸水紙吸干后用油鏡觀察。


抗酸染色的染液配制

1、石炭酸復(fù)紅

堿性復(fù)紅酒精飽和溶液 10mL

5%石炭酸 90mL


2、3%鹽酸酒精

濃鹽酸 3mL

95%酒精 97mL


3、呂氏美蘭液

美蘭酒精飽和液 30mL

氫氧化鉀(1:10000) 100mL




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