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組織芯片

更新時(shí)間:2024-09-26

簡(jiǎn)要描述:

組織芯片免疫組化染色是將多種組織以規(guī)則的微陣列方式排列于同一載體上,同時(shí)進(jìn)行相同指標(biāo)的免疫組化檢測(cè)。具有體積小, 標(biāo)本信息含量大 , 一次性實(shí)驗(yàn)即可獲大量結(jié)果。實(shí)驗(yàn)條件更易控制一致,減少批間批內(nèi)誤差,結(jié)果更準(zhǔn)確。節(jié)省試劑,節(jié)省人力物力等優(yōu)點(diǎn)。

組織芯片免疫組化染色是將多種組織以規(guī)則的微陣列方式排列于同一載體上,同時(shí)進(jìn)行相同指標(biāo)的免疫組化檢測(cè)。具有體積小, 標(biāo)本信息含量大 , 一次性實(shí)驗(yàn)即可獲大量結(jié)果。實(shí)驗(yàn)條件更易控制一致,減少批間批內(nèi)誤差,結(jié)果更準(zhǔn)確。節(jié)省試劑,節(jié)省人力物力等優(yōu)點(diǎn)。

 

組織芯片實(shí)驗(yàn)流程:

切片脫蠟至水-抗原修復(fù)-3%的雙氧水處理-畫圈-血清封閉-一抗4℃過夜孵育-二抗室溫孵育-顯色-蘇木素染核-脫水、透明、封片-鏡檢

 

注意事項(xiàng):

1)石蠟切片制片,組織取樣后應(yīng)立即放入固定液中,避免凍存;

 

2)冰凍切片制片應(yīng)取用新鮮組織,以免抗原丟失;

 

3)組織蠟塊可以保存很長(zhǎng)時(shí)間,但是石蠟切片理論上不能超過半年。


組織芯片原理:

1.選取待研究的組織。現(xiàn)在人們利用組織芯片技術(shù)對(duì)人體各組織均有研究,包括肝臟,前列腺,心臟,乳房等等,據(jù)相關(guān)數(shù)據(jù)顯示,在大腦組織中的應(yīng)用最多。醫(yī)學(xué)上常選取一些病變器官進(jìn)行研究。根據(jù)制作方法來分,微陣列主要有石蠟包埋的組織微陣列和冰凍微陣列兩種。

2.經(jīng)檢測(cè)后標(biāo)記出待研究的區(qū)域。組織微陣列的檢測(cè)儀主要是高性能顯微鏡、熒光顯微鏡或共聚焦熒光顯微鏡。適用的檢測(cè)技術(shù)有蘇木精—HE染色,免疫組織化學(xué)(IHC)染色,原位雜交(ISH),熒光原位雜交(FISH),原位PCR,寡核苷酸啟動(dòng)的原位DNA合成(PRINS)等。
3.使用組織芯片點(diǎn)樣儀將標(biāo)記好的組織按設(shè)計(jì)排列在空白蠟塊模上。首先要利用打孔機(jī)在已經(jīng)標(biāo)記好的靶位點(diǎn)上進(jìn)行打孔,將組織芯轉(zhuǎn)入蠟塊??字校貜?fù)操作可轉(zhuǎn)入上千個(gè)樣品組織芯。
4.使用切片機(jī)對(duì)陣列蠟塊進(jìn)行連續(xù)切片即獲得組織芯片。根據(jù)制作方法來分,微陣列主要有石蠟包埋的組織微陣列和冰凍微陣列兩種。后者可以克服上述前者的多種缺陷(含醛基的化合物(可能損傷RNA或使目標(biāo)抗原結(jié)構(gòu)斷裂或破壞抗原——抗體結(jié)合位點(diǎn),另外,石蠟包埋乙醇固定過的組織也無法避免RNA降解)。
組織芯片的出現(xiàn),與基因芯片配合使用在尋找疾病基因中有很好的互補(bǔ)作用。在腫瘤研究中發(fā)揮著重要作用。將基因芯片篩選出的基因作成探針,再將探針與組織芯片中眾多的腫瘤組織進(jìn)行熒光原位雜交,尋找腫瘤發(fā)生發(fā)展的相關(guān)因素。

 

 
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