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TTC染色液

更新時(shí)間:2024-09-26

簡(jiǎn)要描述:

TTC染色液是TTC和活細(xì)胞線粒體內(nèi)的琥珀酸脫氫酶反應(yīng),生成紅色的甲臜,用來表示細(xì)胞的活力。配制多為2%,染色要避光,37度條件下,它是評(píng)價(jià)腦缺血損傷常用的指標(biāo)。

TTC染色液是TTC和活細(xì)胞線粒體內(nèi)的琥珀酸脫氫酶反應(yīng),生成紅色的甲臜,用來表示細(xì)胞的活力。配制多為2%,染色要避光,37度條件下,它是評(píng)價(jià)腦缺血損傷常用的指標(biāo)。

TTC染色液技術(shù)指標(biāo):

1 原理:TTC(2,3,5—氯化三苯基四氮唑)是脂溶性光敏感復(fù)合物,1894年*合成用來檢測(cè)種子的生存能力,1958年開始用來染色檢測(cè)哺乳動(dòng)物組織的缺血梗塞。它是呼吸鏈中吡啶—核苷結(jié)構(gòu)酶系統(tǒng)的質(zhì)子受體,與正常組織中的脫氫酶反應(yīng)而呈紅色,而缺血組織內(nèi)脫氫酶活性下降,不能反應(yīng),故不會(huì)產(chǎn)生變化呈蒼白。

2 取腦:可麻醉后直接取腦或經(jīng)生理鹽水灌注后取腦。因?yàn)槟X組織未用多聚甲醛固定,所以較軟,取腦時(shí)更應(yīng)仔細(xì),保持大腦的完整性。

3 -20度冰箱中速凍20分鐘左右,便于切片。

4 切片:一般切成5-6片,每隔2mm切一片。一刀在腦前極與視交叉連線中點(diǎn)處;第二刀在視交叉部位;第三刀在漏斗柄部位;第四刀在漏斗柄與后葉尾極之間。(參考:張均田,主編.現(xiàn)代藥理試驗(yàn)方法)。如果需計(jì)算面積的話,應(yīng)切得均勻或用專門的腦槽。

5 將切片置于TTC中,常規(guī)濃度為2%,也有用1%或更低濃度的。

6 用錫箔紙蓋住后,放入37C溫箱15~30min,不時(shí)翻動(dòng)腦片,使均勻接觸到染色液。也可以用將腦片放入多孔板,再滴入TTC,覆以圓形蓋玻片使均勻染色。

7 染色后效果:為皮層下梗死。


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