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miRNA熒光定量檢測服務

更新時間:2024-09-26

簡要描述:

miRNA熒光定量檢測服務主要基于實時熒光定量PCR(qPCR)技術。這種技術通過在PCR反應體系中加入熒光標記物,利用熒光信號積累實時監(jiān)測整個PCR進程。在miRNA的檢測過程中,首先將miRNA逆轉(zhuǎn)錄為cDNA,然后通過PCR反應擴增miRNA的序列。在此過程中,miRNA與標記有熒光探針的引物結(jié)合,通過熒光信號的監(jiān)測,實現(xiàn)對miRNA數(shù)量的定量分析。

   miRNA熒光定量檢測服務主要基于實時熒光定量PCR(qPCR)技術。這種技術通過在PCR反應體系中加入熒光標記物,利用熒光信號積累實時監(jiān)測整個PCR進程。在miRNA的檢測過程中,首先將miRNA逆轉(zhuǎn)錄為cDNA,然后通過PCR反應擴增miRNA的序列。在此過程中,miRNA與標記有熒光探針的引物結(jié)合,通過熒光信號的監(jiān)測,實現(xiàn)對miRNA數(shù)量的定量分析。

  應用范圍

  基礎生物學研究:用于研究miRNA在生物體內(nèi)的表達模式、調(diào)控機制及其對細胞功能的影響。

  疾病診斷與預后:miRNA表達譜與多種疾病狀態(tài)相關,包括癌癥、心血管疾病、神經(jīng)系統(tǒng)疾病等。通過熒光定量檢測miRNA,有助于疾病的早期診斷、預后判斷及治療效果監(jiān)測。

  藥物研發(fā):評估藥物對miRNA表達的影響,為新藥開發(fā)提供分子標志物和潛在治療靶點。

  步驟

  RNA提取:使用專用的RNA提取試劑盒從細胞或組織樣本中提取miRNA。

  miRNA逆轉(zhuǎn)錄:利用逆轉(zhuǎn)錄試劑盒將提取的miRNA逆轉(zhuǎn)錄為cDNA。

  qPCR擴增:使用特異的miRNA引物和熒光探針進行PCR擴增,同時監(jiān)測熒光信號的變化。

  數(shù)據(jù)分析:根據(jù)熒光信號的強度和變化,計算miRNA的表達量,并進行統(tǒng)計分析。

  分析方法

  相對定量法:通過比較目標miRNA與內(nèi)參基因(如U6或RNU48)的表達量,確定目標miRNA的相對表達水平。這種方法適用于比較不同樣本間miRNA的表達差異。

  絕對定量法:使用已知濃度的標準品制作標準曲線,根據(jù)樣本的熒光信號強度計算miRNA的絕對數(shù)量。這種方法能夠提供更精確的miRNA表達量信息。

  miRNA熒光定量檢測服務是一種高效、準確的miRNA分析方法,廣泛應用于基礎生物學研究、疾病診斷和藥物研發(fā)等領域。通過熒光信號的實時監(jiān)測和定量分析,能夠深入了解miRNA在生物體內(nèi)的功能和調(diào)控機制,為相關研究和應用提供有力支持。

 

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